全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀因其使用的自動(dòng)化程度高、分析結(jié)果可核對(duì)、樣品信息可留存等,已逐漸被越來(lái)越多的科研院所、衛(wèi)生疾控部分所喜愛(ài)。
如何選型,才能獲得性能較好的菌落計(jì)數(shù)儀,并取得高性?xún)r(jià)比呢?這得從該類(lèi)儀器的原理來(lái)解釋?,F(xiàn)今面市的所有全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀均是采用成像分析法實(shí)現(xiàn)自動(dòng)計(jì)數(shù)的,即由成像硬件+分析軟件所組成,這二塊內(nèi)容的任何一塊上出現(xiàn)失分,都會(huì)嚴(yán)重影響計(jì)數(shù)分析結(jié)果的穩(wěn)定性。
一、成像硬件的選型
成像硬件用于獲得清晰有效的菌落圖像,以便分析計(jì)數(shù)?,F(xiàn)今的成像硬件有拍照成像的、掃描成像的。由攝像頭拍照成像的優(yōu)點(diǎn)是:成像速度快,能確保在0.5秒內(nèi)獲得菌落圖像。由單反相機(jī)、卡片機(jī)拍照成像的優(yōu)點(diǎn)是:能自動(dòng)對(duì)焦、且像素分辨率一般更高,但其成像需要3~4秒的時(shí)間。
然而,拍照成像的致命弱點(diǎn)是:成像環(huán)境中的光線強(qiáng)度,無(wú)論是暗視野,還是背光,想要做到圖像中心與邊緣保持*一致,相對(duì)來(lái)說(shuō)比較困難。從而引起平皿上亮度的不一致。
針對(duì)環(huán)境光干擾成像方面,通過(guò)對(duì)儀器照明系統(tǒng)進(jìn)行精密的設(shè)計(jì),上下光源采用了寬光帶的LED柔光系統(tǒng),并結(jié)合"懸浮式暗視野"成像系統(tǒng),不僅能夠消除玻璃培養(yǎng)皿的折射光斑,而且通過(guò)改變光比,使得菌落表面的皺折、凹陷、邊緣的鋸齒更富立體感。
掃描成像與在燈箱中營(yíng)造均勻面光源不同,是將線光源通過(guò)移動(dòng)變成面光源的,光線強(qiáng)度相對(duì)比較均勻,其均勻度通常比拍照燈箱的面光源要高一個(gè)數(shù)量級(jí),從成像硬件的上解決了菌落目標(biāo)的亮度不勻問(wèn)題,但掃描只是平面的效果,不能展現(xiàn)培養(yǎng)基表層和深層的細(xì)微菌落,且不能展現(xiàn)菌落顏色等多方面的情況,對(duì)于觀察分析而言構(gòu)成了一定難度。
二、分析軟件的選型
分析軟件是全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀 的另一塊核心成分。因?yàn)榫渖锏拇嬖诙鄻有?,在培養(yǎng)基上的表現(xiàn)或顯像不可能大體一致,針對(duì)這類(lèi)變化,在分析軟件選型上要考慮:對(duì)于各類(lèi)成像干擾的自動(dòng)排出能力。
比如:是否能自動(dòng)矯正背景,等等。另外,對(duì)于嚴(yán)重粘連在一起的團(tuán)裝、鏈狀分布菌落,將其自動(dòng)分割開(kāi)來(lái)的水平,也是評(píng)價(jià)分析軟件的考量指標(biāo)。尤其是:對(duì)于同類(lèi)菌落的"一鍵"化的智能分類(lèi)計(jì)數(shù)能力,以及對(duì)于菌落計(jì)數(shù)分類(lèi)的自動(dòng)識(shí)別學(xué)習(xí)能力,更是評(píng)價(jià)分析軟件的關(guān)鍵考量指標(biāo)。
現(xiàn)在比較好的分析軟件,具有圖像處理、圖像編輯、統(tǒng)計(jì)功能、測(cè)量功能、數(shù)據(jù)庫(kù)管理、以及對(duì)抗生素效價(jià)分析、藥敏分析功能、多培養(yǎng)皿統(tǒng)計(jì)、螺旋平皿統(tǒng)計(jì)等一系列功能。